散斑或斑点样印迹
组织或细胞系中的蛋白表达水平低
我们建议使用 BioGPS 或 Human Protein Atlas 等表达谱分析工具以及科学文献，来查找细胞或动物组织是否预期能够充分表达目的靶蛋白。我们始终建议设置已知的阳性对照，以判断实验结果。如需了解我们许多抗体的推荐对照信息，请参阅我们靶标的阳性对照处理表。
对于全细胞提取物，每个泳道建议上样至少 20-30 ug 的蛋白，以便检测全组织提取物中的靶标总量/未修饰靶标量。然而，通常需要将总蛋白上样量增加到每个泳道至少 100ug，以检测全组织提取物中的修饰靶标（如磷酸化和剪切靶标）。当组织中只有一小部分细胞含有翻译后修饰靶标时，全组织提取物可能需要上样更多蛋白。在细胞提取物中加入蛋白酶和磷酸酶抑制剂，对于避免蛋白降解和维持蛋白得率至关重要。我们建议往裂解缓冲液中加入亮抑酶肽（最终浓度为1.0ug/mL）和 PMSF (#8553) 作为蛋白酶抑制剂。还可以使用 Protease Inhibitor Cocktail (100X) (#5871) 或 Protease/Phosphatase Inhibitor Cocktail (100X) (#5872)。
